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重生08:揭诺奖骗局成为医学巨擎 第27节

  一旁的庄小菲和林柔也愣住了。

  她们俩对这些设备的认知基本停留在见过图片、听说过名字的层面上。有的甚至连听都没听过。然而张沐晨居然不需要学长带,直接上手操作?

  在场所有人里,只有王晔表现的最淡定。

  他站在操作台旁,双手插兜。现在的他,哪怕是张沐晨撕开衬衣露出“S”标志他都不奇怪。

  晨哥就是个怪物。

  遇事不决,晨哥解决。

  这已经是王晔刻在骨子里的认知。

  作为死党,他知道自己现在唯一要做的就是紧紧抱住张沐晨的大腿。等张沐晨开始大杀四方、疯狂装逼的时候,他在一旁比划666就完事。

  但是,韩野和蒋然这两个硕士生没有王晔这种觉悟。

  短暂的错愕后,两个硕士的想法高度一致:这个本科生纯粹是在装逼。

  一个临床大三的,进实验室连移液器都不一定摸过,上来就要自己操作立体定位仪和超声吸引刀?

  开什么玩笑。

  蒋然的余光扫到林柔,随即在心里“哦”了一下。

  明白了,原来是想在漂亮女孩面前显摆,装逼给自己加戏。

  韩野也看到了,和蒋然对视了一眼。两个人没说一个字,但意思已经互相传递清楚:行啊,那就让他显摆,让他装吧。

  立体定位仪和超声吸引刀可不是吹吹牛逼就能上手的。光斑对焦差一个毫米打的就是脑干,磨钻的深度控制不好,颅骨钻透了就是脑组织损伤。

  到时候操作失败别说装逼了,说不定还得喊我们两个学长帮忙。

  想到这,韩野和蒋然各自皮笑肉不笑的往后退了一大步:“学弟,既然你这么有把握,那我们两个当师兄的也就不在这碍手碍脚了。你自己操作吧,我们就在旁边看着。”

  张沐晨点了带你头,走到立体定位仪前把耳杆和鼻夹重新校准到零点,然后退开半步:“王晔,小鼠。”

  王晔赶紧把小鼠从笼子里拿出来递过去。

  张沐晨接过被异氟烷麻醉的小鼠,固定头部,调整鼻夹松紧,确认呼吸通畅。

  韩野看着他的动作,眉头一挑。

  动作很标准,很麻利。该先调哪个旋钮、后锁哪个螺丝,都很精准。

  张沐晨把立体定位仪的坐标调好,转过身看向林柔和庄小菲:“你俩靠近,我教你们怎么记录坐标参数。”

  林柔往前挪了两步,翻开笔记本。庄小菲也凑过来,手里握着笔。

  “这是X轴,左右方向。中缝为零,左侧为正,右侧为负。”张沐晨的手指停在坐标尺的刻度上,“Bregma点校准之后,目标坐标是X:2.5,Y:-1.5。X是外侧,Y是后方。”

  “Y轴,前后方向。Bregma为零,前方为正,后方为负。我们的目标在Bregma后方1.5毫米。锁死。”

  王晔,庄小菲,林柔飞快记下。

  “Z轴,深度。硬脑膜表面为零。激光光栓的靶点在皮层,Z值在0.3到0.5之间,看小鼠的个体差异。先降到0.2,确认没有触碰硬脑膜,再往下。”张沐晨松开锁止旋钮,缓缓降下针尖。他一边操作一边报数。

  “王晔,你来看针尖和颅骨表面的距离。从侧面观察,针尖刚接触硬脑膜的时候,脑表面会有轻微的下压。那个点就是Z轴零点。”

  王晔弯腰,从侧面看。

  “看到下压了吗?”

  “看到了。”

  “好。退到负0.2,锁死。”

  韩野站在旁边,眼睛瞪大。

  张沐晨的这些操作他都很熟悉。但他做不到像张沐晨一样,边操作的同时还给旁边三个人讲清楚所有步骤的的坐标轴、方向、零点判据。

  将按偏头看了韩野一眼,韩野也在看他。

  两个人的眼神里同时浮现疑问:他怎么可以这么熟练?

  像是做过几百次的熟练感。

  “王晔,你过来练。”张沐晨把小鼠从定位仪上取下来,退开半步,“先练固定。”

  王晔点点头,站到定位仪前。

  张沐晨:“小鼠的头部要固定在水平位,不能偏左,不能偏右。鼻夹松紧以不压气管为准。观察腹部起伏,有节奏的呼吸,没有憋气,没有吱吱叫。”

  王晔按着,松了一点,又紧了一下。小鼠没有挣扎。

  “可以了。”张沐晨说。

  王晔呼出一口气。

  “好,我现在演示开颅。颅骨钻转速调到20,000转,生理盐水持续滴注降温。从Bregma点开始,先标记骨窗边界。看到矢状缝和中缝十字交叉点了吗?那是Bregma。以它为原点,向右2.5毫米,向后1.5毫米,画十字。”

  钻头落下,骨屑飞溅,随后被生理盐水冲走。

  张沐晨沿着标记线的边缘走了一圈,骨片微微翘起。他用镊子尖轻轻一挑,骨片脱离,硬脑膜暴露出来。银白色,没有破损,没有出血。

  “就这样操作。”张沐晨偏头看向林柔,“林柔,过来做接下来操作。”

  林柔抿了下唇,走过来。

  说实话,给小鼠开颅是一个很血腥的过程。虽然颅骨钻磨骨的时候只有微量渗血,但骨头磨开之后看到的景象是的硬脑膜和粉白色的血管搏动脑组织。

  这种直面生命中枢的画面对林柔的心理有着极大的冲击。

  作为大三本科生,林柔几乎没有接触过这种实验。但对于一个以后想要踏上神经领域的人来说,这是绕不过去的必修课。

  要做到熟视无睹才算合格。

  张沐晨把微量注射器递给她:“尾静脉注射玫瑰红,剂量20毫克每公斤。然后激光照射。轻度组30秒,中度组90秒,重度组180秒。损伤完成之后缝合头皮,放回笼子。24小时后注射FITC-dextran,再过2小时灌流取材。”

  林柔接过注射器,手指微微收紧。

  “从尾尖三分之一处进针,针头斜面朝上,角度小一点。见回血再推。”张沐晨指导道。

  林柔深吸一口气,针尖刺入皮肤。没有回血。拔出来,重新找位置。第二次,暗红色的血液顺着针管回流了一点。她屏住呼吸,缓慢推注。药液进入血管,没有鼓起皮丘,也没有阻力。

  “可以。”张沐晨说。

  林柔松开注射器。小鼠的眼睛、尾巴、爪子开始变成淡淡的粉红色。这是光敏剂在全身循环的效果。

  张沐晨把532nm激光器拉到骨窗正上方,光斑对准Bregma后方1.5毫米、中缝外侧2.5毫米的坐标点。

  他偏头看了林柔一眼:“继续。”

  林柔站到激光器控制面板前。屏幕上跳动着三个预设程序:30秒、90秒、180秒。

  “90秒?”她问。

  “嗯。”

  激光启动,绿色的光点落在硬脑膜上。90秒后,激光自动关闭,硬脑膜上没有焦痕,没有出血。

  一直在看着的韩野和蒋然知道,激光激活了玫瑰红产生活性氧,正在靶向损伤周细胞。

  “'妈的,太牛逼了。”韩野和蒋然心里暗叹。

  一个本科生对立体定位仪的熟悉程度不输研三,调激光器更是手拿把掐。

  之前他们觉得张沐晨在装逼,现在发现他不是在装,他是真的会。

  “庄小菲。”张沐晨喊了一声。

  “啊?”庄小菲抬头。

  “你负责记录实验数据。今天的日期、小鼠编号、分组、坐标参数、激光功率、损伤时间,每台设备的运行参数。以后写论文的时候这些数据缺一个都没办法回溯。”

  庄小菲赶紧翻开笔记本,在第一行写下日期:2008年10月......

  张沐晨给小鼠缝合头皮,完成后看了一眼墙上的挂钟:“24小时后注射FITC-dextran。现在是下午三点。明天下午三点准时注射。”

  张沐晨走到小鼠笼边,把刚做完光栓的那只小鼠放回去。小鼠蜷在笼角,鼻子轻轻抽动,胡须一颤一颤的。

  刚被开颅、被激光照射、被缝合头皮,但它活着。呼吸平稳。

  “明天的注射是整个实验最难的一环。”张沐晨看向几个人,“小鼠注射过玫瑰红,尾静脉穿刺会造成局部炎症和微小血栓,光敏剂对血管壁也有刺激。所以小鼠的静脉会红肿、僵硬、管腔狭窄。第二次注射只能靠手感。”

  “温水浸泡或酒精擦拭可以让血管扩张,但这个节段已经硬化了,扩张有限。所以进针角度要比平时大一点,穿透皮肤后稍微上挑就是进到管腔了。”

  韩野和蒋然对视了一眼,眼神里是藏不住的惊叹。

  蒋然咽了口唾沫,开口提问道:“学弟,我以前做这一步的时候明明感觉针扎进去了,但一推药,小鼠经常会出现剧烈的抽搐,几秒钟内就当场猝死,这是为什么?”

  张沐晨:“推得太快或者分子量计算错误。40kDa的FITC-dextran很黏稠,血管硬化后管腔狭窄。如果像注射普通生理盐水那样会导致小鼠脑部血液回流受阻,颅内压暴增,诱发急性脑疝。所以标准做法是全程匀速慢推,控制在20到30秒。”

  蒋然如认真的点点头。

  这时,韩野也紧凑了过来,虚心求教道:“学弟,FITC-dextran注射后循环多久灌流?不同分子量的时间不一样,40kDa怎么定?”

  “30到60分钟。40kDa介于4kDa和150kDa之间。时间短了渗漏面积不够,时间长了背景太高。文献上是30分钟起,我们可以做到45分钟。”

  韩野点了点头,在笔记本上写下要点。

  林柔和庄小菲也提了几个问题,张沐晨都一一解答。

  一时间,实验室所有人都围在张沐晨身边。

  这时,实验室的门被推开,李芳然走进来。

  一进屋,他就看到实验台前围的满满当当,自己的两个硕士生躬着腰做笔记。

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