重生08:揭诺奖骗局成为医学巨擎 第147节
行家一出手,就知有没有。
就张沐晨现在的思路和操作手法,顾弘院士能给到夯爆了!
操作台前,最后一微升特异性长链引物被打入八号离心管。随后加入核酸缓冲保护液,盖紧管盖,放到微型涡旋振荡器上混匀一秒,随后反扣在零下二十度无菌冰盒中。
咔哒。
张沐晨双手平举,脱下乳胶手套扔进弃物桶。
“结束。”他吐出口气。
八管特异性反应体系与酶促富集母液整整齐齐立在试管架上。
张沐晨站起身,迎着所有人的目光:“顾院士,各位老师教授。新型病毒PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M、NS八个分节段的全长特异性引物和靶向富集体系全部构建完毕。”
实验室安静片刻,所有的视线都聚焦在那八管离心管上。
顾弘院士走上前,目光从试管架移到张沐晨脸上。
“张医生,你刚才的操作手法,配液逻辑,抑制思路都非常出彩,挑不出毛病。”
“但是理论再完美,配方再精妙,也是需要实际数据验证的。这套引物体系能不能咬合,会不会脱靶,必须按两级质检的标准跑一遍。”
站在后方的几位教授点头。
如果两级质检不通过,就证明引物体系是失败的。但是如果通过,就省去了反复摸索引物梯度的试错过程,省下一大半时间。
“明白。”张沐晨颔首,“先做第一级理化质检,排查引物纯度和二聚体自连。等第一批病毒RNA模板出来,立刻启动第二级长片段特异性扩增验证。”
“嗯,上机吧。”顾弘院士认可。
张沐晨取样品,走向超微量紫外分光光度计。
取样、点样、臂杆下落、激光光路激发。
几秒后,仪器联机屏幕上刷新出八组吸收光谱曲线。
“A260/A280比值全部落在1.84到1.88之间。基线平滑,没有有机试剂残留峰,也没有蛋白质背景吸收。引物合成纯度与浓度配比全部达标。”
紧接着,样品被点入变性聚丙烯酰胺凝胶加样孔中。
电泳槽通电。
二十五分钟后,凝胶成像仪的紫外冷光在暗箱中亮起。
顾弘院士,孙明远教授,王所长几个人同时俯下身子,看着显示屏。
屏幕中央,八条泳道的单链引物条带致密明亮。凝胶底部和泳道上方干干净净,没有引物二聚体杂带,也没有断裂降解的弥散拖尾。
这意味着什么?
“第一级质检通过!”王所长低呼出声。
顾弘院士不动声色,道:“还有第二级,稳住心态,继续实验。”
不多时,传递窗发出泄压排气声。
第一批提取完成的病毒RNA原液滑出传递窗。
张沐晨迅速将特异性反应体系与这批出来的病毒RNA模板混合,随后设定好扩增程序。
启动,升温,变性,退火,超长链延伸。
四十五分钟反应周期。
实验室里的专家教授们都悬着一口气。
电子时钟的数字不断跳着。
没有一个人走动,没有一个人出声。大家就这样盯着反应仪器。
“滴����”
四十五分钟,PCR仪发出蜂鸣提示音。
“关灯,看胶!”
饶是顾弘院士,也忍不住的声音变急。
暗箱门合拢,透射紫外光源开启。
显示屏显示出电泳图谱。
所有人目光一凝,紧紧盯着屏幕。
八个测试泳道内,醒目的纯净亮带映入所有人视线。
基因节段全部锚定!
什么概念?
“全长特异性扩增全部成功?!”
“卧槽......”
“牛逼啊......”
饶是见惯大风大浪的教授们也忍不住爆粗。
王所长胸膛起伏,声音发颤:“一次成型,零杂带!张医生,你做到了!牛啊!!”
赵宏博教授满脸激动,但也满脸震撼:“不可思议......没有经过任何摸索试错,居然就把八个片段的全长全都抓齐了!神迹啊!”
其余教授们同样震撼,头皮发麻。
没见过,根本没见过面对新毒株一次性成功的。
教授们见过很多天才,但是此刻,他们只想称张沐晨为天才!
顾弘院士缓缓走近张沐晨,一只手放在他的肩膀上:“后生可畏啊。”
他长长舒了一口气,看向其余人:“我这个攻坚组组长的身份现在交给张医生。接下来的技术决策全听张医生安排。我们的目标只有一个,七天内测序完成!”
所有人神色一凛。
“全力配合!”
在场的每一位都是手握国家重大专项的专家。但在此刻,在这个实验室,头衔、资历、学术地位全排到末尾。
他们是在为国家筑防线,保护民众安危。
病毒不等人,疫情更不会留情。
早点拿到基因组图谱,早点摸清抗原漂移规律,疫苗研发才能早点成功。
张沐晨迎着所有教授们的目光,深吸一口气,向着全场前辈们郑重点头:“感谢顾院士和各位老师的托付。”
“现在引物验证完成,我们需要立刻推进建库和双机装载。”
张沐晨在白板上写下任务。
“赵宏博教授带队负责全长产物的磁珠纯化和Qubit超微量荧光定量,将小分子残留压低,确保母液纯度。”
“孙明远教授负责二代高通量文库构建,片段化,末端修复加A尾......”
“王所长统筹芯片活性孔质检和降噪缓冲液温控.......”
“.......”
“我和顾院士负责双平台的混样标定和芯片装载控制。”
分配完任务,各位教授带着研究员们迅速展开操作。
磁珠纯化、接头挂载、文库分装、芯片质检......
没有返工,没有误判,每一步环环相扣。
整个实验室的陷入一种既高效紧张的氛围中。
..........
时间一分一秒流逝。
超净台上,张沐晨将两组调试完毕的文库分别注入二代高通量测序仪和单分子长读长测序芯片的进样口。
咔哒。
舱门锁死。
【初始化自检完成,激光光路对准。】
【电信号采集阻抗正常,流动槽温控锁定。】
张沐晨按下启动键,屏幕亮起。
代表碱基捕获和单分子穿孔的荧光光点实时刷新。
张沐晨看了一眼主监控界面上的倒计时:“测序需要十二个小时,明天上午十点左右差不多能完成。”
紧绷的实验室松弛下来。
第一天的核心攻坚圆满完成。
“留两个值班的盯一下恒温槽和废液报警,其余人不用在这里干耗着了。”顾弘道,“都回去好好睡一觉,养精蓄锐。明早十点,我们这里碰头。”
一众专家们脱下白大褂,洗手消毒,走出实验室。
攻坚期间,疾控中心给所有专家在研究所的接待酒店安排了住宿。
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